Identifikasi DNA babi sebagai metode validasi untuk autentikasi halal menggunakan polymerase chain reaction
Bilah Samping Artikel
Isi Artikel Utama
Page: 1778-1784
Abstrak
Sebagai upaya untuk melindungi konsumen dari pelabelan halal palsu pada produk makanan, kosmetik maupun obat-obatan maka dibutuhkan suatu metode yang mampu menjamin kehalalan dari suatu produk. Daging babi menjadi salah satu jenis yang sering digunakan untuk mencampur dengan daging sapi dikarenakan kedua daging tersebut memiliki kemiripan secara fisik apabila tidak diperhatikan secara seksama. Analisis berbasis DNA yang sering digunakan untuk autentikasi halal yaitu metode real time PCR, sehingga pada penelitian ini bertujuan untuk membuktikan bahwa metode PCR konvensional mampu mendeteksi DNA pada konsentrasi yang sama. Penelitian ini menggunakan dua parameter yaitu uji spesifitas dilakukan menggunakan sampel DNA babi serta DNA sapi dan ayam sebagai pembanding. Parameter kedua yaitu uji batas deteksi pada DNA absolut dilakukan pada 4 konsentrasi yaitu 50; 5; 0,5 dan 0,05 ng/µL, sedangkan uji batas deteksi relative (campuran daging babi-sapi) dengan variasi konsentrasi daging babi yaitu 100%, 5%, 3%, 1%, dan 0,5%. Hasil analisis menunjukkan primer spesifik terhadap DNA babi dengan hasil batas deteksi absolut yaitu 0,05 ng/µL dan batas deteksi relative yaitu 0,5%. Metode PCR ini memenuhi persyaratan validasi untuk mengidentifikasi spesies target sehingga dapat digunakan untuk autentikasi halal pada bebagai produk.
Unduhan
Rincian Artikel
Artikel ini berlisensiCreative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.
Referensi
Aina, G. et al. (2019) ‘The employment of q-PCR using specific primer targeting on mitochondrial cytochrome-b gene for identification of wild boar meat in meatball samples’, Journal of Advanced Veterinary and Animal Research, 6(3), p. 300. Available at: https://doi.org/10.5455/javar.2019.f348.
Amresco (1998) ‘Electrophoresis Loading Dyes for Acrylamide and Agarose Electrophoresis (E190, E269, E274)’. Available at: https://www.interchim.fr/ft/6/662600.pdf (Accessed: 10 September 2023).
Che Man, Y.B. et al. (2012) ‘Porcine-Specific Polymerase Chain Reaction Assay Based on Mitochondrial D-Loop Gene for Identification of Pork in Raw Meat’, International Journal of Food Properties, 15(1), pp. 134–144. Available at: https://doi.org/10.1080/10942911003754692.
FDA (2019) ‘Guidelines for the Validation of Analytical Methods for Nucleic Acid Sequence-Based Analysis of Food, Feed, Cosmetics, and Veterinary Products’. U.S. Food and Drug Administration.
Guntarti, A. et al. (2015) ‘FTIR Spectroscopy in Combination with Chemometrics for Analysis of Wild Boar Meat in Meatball Formulation’, Asian Journal of Biochemistry, 10(4), pp. 165–172. Available at: https://doi.org/10.3923/ajb.2015.165.172.
ICH (2022) ‘ICH guideline Q2(R2) on validation of analytical procedures’. European Medicines Agency. Available at: https://www.ema.europa.eu/en/ich-q2r2-validation-analytical-procedures-scientific-guideline (Accessed: 9 September 2023).
IkaWidyasa, Y., . S. and Rohman, A. (2015) ‘Detection of Rat Meat Adulteration in Meat Ball Formulations Employing Real-Time PCR’, Asian Journal of Animal Sciences, 9(6), pp. 460–465. Available at: https://doi.org/10.3923/ajas.2015.460.465.
Li, Jinchun et al. (2021) ‘Identification of eleven meat species in foodstuff by a hexaplex real-time PCR with melting curve analysis’, Food Control, 121, p. 107599. Available at: https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2020.107599.
Marín, D.V. et al. (2021) ‘An optimised high-quality DNA isolation protocol for spodoptera frugiperda J. E. smith (Lepidoptera: Noctuidae)’, MethodsX, 8, p. 101255. Available at: https://doi.org/10.1016/j.mex.2021.101255.
Mariyani, Sismindari, and Rumiyati (2021) ‘Validasi Metode Real-Time Polymerase Chain Reaction untuk Deteksi DNA Babi (Sus Scrofa Domestica) dan Celeng (Sus Barbatus) pada Sosis Sapi’, Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia, 6(8). Available at: https://doi.org/10.36418/syntax-literate.v6i8.3806.
Maryam, St. et al. (2016a) ‘Determination of Porcine Contamination in Laboratory Prepared dendeng Using Mitochondrial D-Loop686 and cyt b Gene Primers by Real Time Polymerase Chain Reaction’, International Journal of Food Properties, 19(1), pp. 187–195. Available at: https://doi.org/10.1080/10942912.2015.1020434.
Maryam, St. et al. (2016b) ‘Determination of Porcine Contamination in Laboratory Prepared dendeng Using Mitochondrial D-Loop686 and cyt b Gene Primers by Real Time Polymerase Chain Reaction’, International Journal of Food Properties, 19(1), pp. 187–195. Available at: https://doi.org/10.1080/10942912.2015.1020434.
Nakyinsige, K., Man, Y.B.C. and Sazili, A.Q. (2012) ‘Halal authenticity issues in meat and meat products’, Meat Science, 91(3), pp. 207–214. Available at: https://doi.org/10.1016/j.meatsci.2012.02.015.
Sasmito, D.E.K., Kurniawan, R. and Izzati, M. (2014) ‘Karakteristik Primer pada Polymerase Chain Reaction (PCR) untuk Sekuensing DNA: Mini Review’, Seminar Nasional Informatika Medis (SNIMed) V [Preprint].
Sepminarti, T. et al. (2015) ‘Real-Time Polymerase Chain Reaction for Halal Authentication of Gelatin in Soft Candy’, Asian Journal of Biochemistry, 11(1), pp. 34–43. Available at: https://doi.org/10.3923/ajb.2016.34.43.
Sismindari (2012) Replikasi DNA Dan Mutasi, 1st ed, Seri Biologi Molekuler Farmasi. Yogyakarta: Pustaka Pelajar (1).
Skouridou, V. et al. (2019) ‘Duplex PCR-ELONA for the detection of pork adulteration in meat products’, Food Chemistry, 287, pp. 354–362. Available at: https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2019.02.095.
Wahyuni, S., Maryam, S. and Aminah, A. (2019) ‘Validasi Metode Analisis Cemaran DNA Babi pada Bakso Sapi Menggunakan Primer Mitokondria D-Loop22 dengan Metode Polymerase Chain Reaction (PCR): Analysis Method Validation of Pig DNA Contamination in Cow Meatballs Using Mitochondrial Primer D-Loop22 by Polymerase Chain Reaction (PCR) Method’, Jurnal Farmasi Galenika (Galenika Journal of Pharmacy) (e-Journal), 5(1), pp. 65–72. Available at: https://doi.org/10.22487/j24428744.2019.v5.i1.12035.